КОНСТРУИРОВАНИЕ НАДМОЛЕКУЛЯРНОЙ ИНДИКАТОРНОЙ СИСТЕМЫ "ЦЕЛЛЮЛОЗА - НАНОАЛМАЗ - УРЕАЗА"

Описание

Перевод названия: THE DESIGNING OF SUPRAMOLECULAR INDICATOR SYSTEM ‘CELLULOSE - NANODIAMOND - UREASE’

Тип публикации: статья из журнала

Год издания: 2018

Ключевые слова: наноалмаз, целлюлоза, уреаза, иммобилизация, надмолекулярный комплекс, индикаторная система, nanodiamond, cellulose, urease, immobilization, supramolecular complex, indicator system

Аннотация: Последовательной иммобилизацией компонентов сконструирована надмолекулярная индикаторная сис- тема биохимического определения мочевины: целлюло- за - наноалмаз - уреаза. Модифицированные наноалма- зы (МНА) ковалентно иммобилизованы на полимерный носитель (гранулы ДЭАЭ-целлюлозы) с помощью реак- ции нуклеофильного присоединения. УстПоказать полностьюановлено, что данная реакция, проводимая при весовом соотношении компонентов 4:1 (ДЭАЭ-целлюлоза : МНА), позволяет иммобилизовать до 110 мкг наночастиц на 1 мг полиме- ра. Биомаркер (фермент уреаза) был иммобилизован с помощью ковалентной пришивки на полученный компо- зит «полимер - МНА», поверхность которого была предварительно активирована бензохиноном. В срав- нительных экспериментах фермент иммобилизовали на исходные гранулы полимера с помощью неспецифиче- ской адсорбции и ковалентной пришивки. Активность фермента в полученных надмолекулярных комплексах определяли уреазным салицилат-гипохлоритным ме- тодом по образованию окрашенного продукта, который оценивали спектрофотометрически. Показано, что молекулы уреазы могут быть иммобилизованы на гра- нулы ДЭАЭ-целлюлозы посредством адсорбции и кова- лентной пришивки, проявляя после этого функциональ- ную активность в обоих случаях. Однако было показано, что при многоразовом использовании этих индикатор- ных систем для тестирования аналита наблюдается заметная инактивация фермента, что сопровождается снижением выхода окрашенного продукта. В то же вре- мя в сравнительных экспериментах было установлено, что фермент, ковалентно иммобилизованный на компо- зит «ДЭАЭ-целлюлоза - МНА», обладает большей функциональной эффективностью и обеспечивает бо- лее стабильный выход цветного продукта при много- кратном тестировании мочевины. Сравнительные ис- следования показали, что фермент, ковалентно при-шитый на композит «ДЭАЭ-целлюлоза - МНА», облада- ет также большей термостабильностью и значитель- но медленнее теряет активность при многоразовом использовании индикаторной системы для тестирова- ния мочевины при температуре 37 °C по сравнению с ферментом, ковалентно иммобилизованным на поли- мер. Результаты проведенных исследований открыва- ют перспективы конструирования нового класса мно- горазовых систем индикации (надмолекулярных ком- плексов «полимерный носитель - наноалмаз - биомар- кер») для биомедицинской аналитики.

Ссылки на полный текст

Издание

Журнал: Вестник Красноярского государственного аграрного университета

Выпуск журнала: 6

Номера страниц: 277-282

ISSN журнала: 18194036

Место издания: Красноярск

Издатель: Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Красноярский государственный аграрный университет"

Авторы

  • Посохина Е.Д. (Сибирский федеральный университет)
  • Ронжин Н.О. (Институт биофизики СО РАН - обособленного подразделения ФИЦ КНЦ СО РАН)
  • Барон А.В. (Институт биофизики СО РАН - обособленного подразделения ФИЦ КНЦ СО РАН)
  • Бондарь В.С. (Институт биофизики СО РАН - обособленного подразделения ФИЦ КНЦ СО РАН)

Вхождение в базы данных