Тип публикации: диссертация
Год издания: 2017
Ключевые слова: биолюминесценция, флуоресценция, фотопротеины, целентеразин, апобелок, гребневики, фотоинактивация, беровин
Аннотация: Фотопротеины ктенофор - это малоизученные белки, перспективные для индикации кальция. Объект исследования - гребневик Beroe abyssicola. Цель исследования - клонирование и экспрессия генов фотопротеина беровина, определение его физико-химических свойств и роли аминокислот активного центра в биолюминесценции. Определяли: условия экспПоказать полностьюрессии, очистки, активации и биолюминесценции; спектры поглощения и излучения; кинетику биолюминесцентного сигнала и фотоинактивации; зависимость биолюминесценции от концентрации кальция; термостабильность; пространственную структуру с ионами магния. Получен рекомбинантный фотопротеин беровин, определены его физико-химические свойства, решена пространственная структура апо-беровина с ионами магния, построена модель пространственной структуры активного центра, предложен механизм стабилизации субстрата во внутренней полости беровина. Получен новый белок, определены его свойства. Показано, что беровин перспективен как репортерный белок для мониторинга динамики кальция в живых клетках.