Тип публикации: отчёт о НИР
Год издания: 2019
Ключевые слова: атеросклероз, ишемическая болезнь сердца, стент, стеноз, бионаноматериал, моноцит, макрофаг, эндотелий, биополимеры
Аннотация: Морфологический анализ эритроцитов в различных вариантах кратковременного культивирования invitro выявил следующие закономерности.?1. Эритроциты пациентов с атеросклерозом были нестабильны в системе invitro: на 3-и сутки культивирования в среде DMEM и в аутологичной плазме на культуральном пластике и на различных ПГА-подложках нормПоказать полностьюоциты, классические двояковогнутые эритроциты, либо отсутствовали, либо их численность составляла несколько процентов.?2. На культуральном пластике в среде DMEM и в аутологичной плазме, до и после стентирования наблюдались 4 аномальных морфотипа: эхиноциты, акантоциты, плоские эритроциты, эритроциты с везикулами. ?3. На немодифицированных подложках на среде DMEM и в аутологичной плазме, до и после стентирования, наблюдались те же самые аномальные морфотипы: эхиноциты, акантоциты, плоские эритроциты, эритроциты с везикулами. ?4. На модифицированных подложках на среде DMEM и в аутологичной плазме, до и после стентирования, наряду с вышеупомянутыми 4-мя морфотипами наблюдался 5-й аномальный морфотип – стоматоциты. ?5. При культивировании в среде DMEM, до и после стентирования, на исследованных ПГА-подложках (немодифицированные и модифицированные варианты) численность эритроцитов с везикулами была значительно выше, чем на культуральном пластике в тех же самых условиях культивирования. Это свидельствует о влиянии поверхностного рельефа исследованных ПГА-подложек на активность образования микровезикул на мембране эритроцитов (активации этого процесса).?5. При культивировании в аутологичной плазме, до и после стентирования, на исследованных ПГА-подложках (немодифицированные и модифицированные варианты) численность эритроцитов с везикулами достоверно не отличалась от варианта на культуральном пластике в тех же самых условиях культивирования. Это свидетельствует об отсутствии влияния поверхностного рельефа исследованных ПГА-подложек на активность образования микровезикул на мембране эритроцитов в аутологичной плазме.?6. Вариабельность количественных соотношений различных аномальных морфотипов эритроцитов зависела от:?- функционального статуса выделенных эритроцитов (до или после стентирования);?- среды культивирования (DMEM или аутологичная плазма крови);?- соотношения нано- и микропаттернов в составе поверхностного рельефа немодифицированных и модифицированных ПГА-подложек.?Полученные результаты позволяют рассматривать эритроциты в кратковременной культуре invitro как очень чувствительную модельную систему для изучения мембранотропных эффектов поверхностных рельефов ПГА-пленок.?Морфологический анализ тромбоцитов в различных вариантах кратковременного культивирования invitro выявил следующие закономерности.?1. Особенности поверхностного рельефа ПГА-подложек определяют вариабельность активности адгезии тромбоцитов, количества и размеров агрегатов, активности слияния агрегированных тромбоцитов в синцитии.?2. Дополнительная наноструктуризация поверхностного рельефа модифицирует биологическую активность ПГА-подложек: их адгезивность для тромбоцитов значительно возрастает, по сравнению с немодифицированными рельефами. ?3. Биологическая активность поверхностного рельефа invitro не является «однозначным» внутренним свойством самого рельефа, но может значительно варьировать в зависимости от исходного функционального состояния тромбоцитов (до и после стентирования) и наличия паракринного сигналинга (ко-культивирование с эритроцитами). ?Для оценки функционального состояния эритроцитов и тромбоцитов в различных условиях культивирования на ПГА-подложках использовали МТТ-тест. Было показано, что:?1. Активность восстановления МТТ в эритроцитах и тромбоцитах варьирует в зависимости от особенностей поверхностного рельефа. Характер этой вариабельности существенно различается для вариантов до и после стентирования.?2. Увеличение активности восстановления МТТ свидетельствует о включении элементов поверхностного рельефа в индукцию окислительного стресса в эритроцитах и тромбоцитах. ?Было показано, что эндотелиальные клетки пуповинной вены не пролиферируют на подложках из немодифицированных и модифицированных ПГА-пленок: активность включения BrdU в вариантах на подложках была очень низкой (на уровне фонового неспецифического связывания).?