Тип публикации: отчёт о НИР
Год издания: 2016
Ключевые слова: биотестирование, люцифераза, микрофлюидные аналитические системы, капельная микрофлюидика, биосенсор, экологический мониторинг, парамагнитные наночастицы, наноалмаз
Аннотация: В ходе выполнения второго этапа проекта работа выполнялась по двум основным направлениям: доработке аналитической системы на основе одноразовых люциферазных микрофлюидных чипов и создании проточной капельной аналитической системы для биотестирования. В области аналитической системы на основе одноразовых микрофлюидных чипов была проПоказать полностьюведена оптимизация топологии чипов и способа размещения реагентов в них. Также была улучшена установка для низкотемпературной герметизации чипов, что позволило проводить одновременную герметизацию до 5 чипов в зависимости от их размеров. Кроме того, были начаты эксперименты по изучению условий и способов хранения одноразовых чипов, которые продолжатся на следующем этапе проекта. Помимо этого была произведена интеграция компонентов люциферазной микрофлюидной платформы (чипов, детектора, перемешивателя) и разработан прототип портативного аналитического устройства. В области разработки проточной аналитической системы для биотестирования в каплях были разработаны две топологии микрофлюидных генераторов капель для получения капель различных объемов 4–500 пл. Для этого широко применялись методы численного моделирования. Для испытания этих чипов был собран специальный экспериментальный стенд на основе ФЭУ и специального ПО для анализа сигналов ферментативных реакций в каплях проточных чипов. Все это позволило разработать методику проточного ферментативного биотестирования в каплях. Получившаяся ферментативная биолюминесцентная система в каплях обладает в 10 раз большей чувствительностью к медному купоросу, чем она же, но иммобилизованная в одноразовых микрофлюидных чипах. Для дальнейшего развития полученной методики биотестирования в каплях необходимо стабилизировать ферменты до того момента, когда они необходимы в биолюминесцентной реакции. Для этого была получена технология формирования комплекса nDC-люцифераза и зарегистрирован биолюминесцентный сигнал от отдельных капель, в которые люцифераза была доставлена с помощью nDC. Проведенные работы и полученные в рамках данного этапа результаты соответствуют перечню заявленных работ и позволяют приступить к выполнению третьего этапа проекта. Информация о проекте в сети Интернет: http://mfba.molpit.org