Тип публикации: статья из журнала
Год издания: 2022
Идентификатор DOI: 10.20333/25000136-2022-2-78-87
Ключевые слова: bronchial asthma, children, cytokines, exhaled breath condensate, polymorphism, dna, gene, бронхиальная астма, дети, цитокины, конденсат выдыхаемого воздуха, полиморфизм, днк, ген
Аннотация: Цель исследования. Оценить уровни цитокинов, характеризующих баланс Th1/Th2/Th17 лимфоцитов в конденсате выдыхаемого воздуха, а также исследовать роль полиморфных вариантов генов этих цитокинов у детей г. Красноярска при бронхиальной астме (БА) в зависимости от степени тяжести и уровня контроля заболевания. Материал и методы. ИсслеПоказать полностьюдуемая группа - 104 ребенка с БА и 65 детей без бронхолегочных и аллергических заболеваний в анамнезе. Диагностика, степень тяжести и уровень контроля заболевания были установлены в соответствии с рекомендациями рабочей группы GINA. Дети с БА были разделены на группы по степени тяжести и уровню контроля астмы. Материал исследования - конденсат выдыхаемого воздуха (КВВ) и ДНК из периферической крови. Выделение ДНК проводилось сорбентным методом, генотипирование осуществлялось при помощи метода ПЦР в режиме реального времени. Сбор КВВ осуществляли с помощью прибора RTube Exhaler Breath Condensate Collector. Концентрацию цитокинов в нативных образцах КВВ определяли с помощью системы мультиплексного иммуноанализа MagPix. Обработку результатов проводили с помощью пакета программ Statistica для Windows 10.0 и Microsoft Excel, 2007. Сравнение частот аллелей и генотипов проводили с помощью online-калькулятора, теста χ-квадрат. Отношение шансов (ОШ) с 95%-ным доверительным интервалом (ДИ) проводилось для связи генетических маркеров с фенотипами патологии. Результаты. При сравнении частоты генотипов и аллелей полиморфизма IL13 rs1800925 в группах БА и контроля нами было показано статистически значимое отличие в отношении генотипа CC и аллеля T. Кроме того, было обнаружено, что частота встречаемости генотипа AA IL17A rs2275913 выше в группе с контролируемой БА, а также в группе с легкой степенью тяжести БА. Не было выявлено статистически значимых отличий по полиморфизмам IL4 rs2243250, IL5 rs2069812, IFNy rs2069705 между группами больных и контроля. При определении концентрации цитокинов в КВВ были обнаружены лишь «следовые» количества исследуемых аналитов. Значения концентраций для цитокинов IL-13, IL-17A и IL-4 были чуть выше порога чувствительности используемого метода и набора. IFN-y и IL-5 удалось обнаружить лишь у 2 пациентов. Заключение. В ходе исследования не было обнаружено ассоциации полиморфных генов с уровнями концентрации цитокинов в конденсате выдыхаемого воздуха. The aim of the research. To assess the levels of cytokines characterising the balance of Th1 / Th2 / Th17 lymphocytes in the expired breath condensate, as well as to study the role of polymorphic variants of these cytokine genes in Krasnoyarsk children with bronchial asthma (BA), depending on the severity and of the disease control level. Material and methods. The study group included 104 BA children and 65 children without bronchopulmonary and allergic diseases in medical history. The diagnosis, severity and disease control level were established in accordance with the recommendations by the GINA working group. Children were divided into groups depending on the severity and BA control level. Research material was considered to be the expired breath condensate (EBC) and DNA from peripheral blood. DNA isolation was carried out by the sorbent method, and genotyping was performed by the real-time PCR method. EBC was collected using the RTube Exhaler Breath Condensate Collector. The concentration of cytokines in native EBC samples was determined using the MagPix multiplex immunoassay system. The results were processed using the Statistica software package for Windows 10.0 and Microsoft Excel, 2007. The allele and genotype frequencies were compared with both an online calculator and the χ-square test. An odds ratio (OR) with a 95 % confidence interval (CI) was carried out to associate the genetic markers with pathology phenotypes. Results. When comparing the genotype and allele frequencies of IL13 rs1800925 polymorphism in BA and control groups, we demonstrated a statistically significant difference for the CC genotype and the T allele. In addition, the prevalence of genotype AA IL17A rs2275913 was found to be higher in the group with controlled ВА, as well as in the group with medium ВА severity. There were no statistically significant differences in the polymorphisms IL4 rs2243250, IL5 rs2069812, IFNy rs2069705 between the patient groups and controls. When determined the concentration of cytokines in EBC, only trace amounts of the analytes under study were revealed. The concentration values for the IL-13, IL-17A and IL-4 cytokines were slightly above the sensitivity threshold of the method and the kit used. IFN-y and IL-5 were detected only in two patients. Conclusion. No association of polymorphic genes with cytokine concentration levels in the expired breath condensate was found in the study.
Журнал: Сибирское медицинское обозрение
Выпуск журнала: № 2
Номера страниц: 78-87
ISSN журнала: 18199496
Место издания: Красноярск
Издатель: Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого