Тип публикации: статья из журнала

Год издания: 2021

Идентификатор DOI: 10.31857/S0026898421030058

Ключевые слова: <i>:</i> FOXC1, melanoma, siRNA, miRNA, quiescent cancer cells, Foxc1, miR-204-5p, меланома, BrO, SK-MEL-2, siРНК, микроРНК, опухолевые дормантные клетки

Аннотация: МикроРНК эпигенетически регулируют физиологические и патологические процессы. Ранее нами выявлено, что микроРНК miR-204-5p низко экспрессирована в клетках меланомы, а повышение ее уровня приводит к изменению пролиферации, миграции и инвазии этих раковых клеток. Теперь с помощью биоинформатического анализа показано, что мишень miR-204-5p – мРНК, кодирующая транскрипционный фактор FOXC1, играющий важную роль в канцерогенезе<i>.</i> С помощью люциферазной репортерной системы обнаружено, что miR-204-5p подавляет экспрессию гена <i>FOXC1</i> посредством связывания с его 3'-некодирующей областью. Трансфекция малой интерферирующей РНК (siРНК), нацеленной на <i>FOXC1</i>, в клетки меланомы вызывала снижение уровня miR-204-5p, что согласуется с общепринятыми представлениями о регуляции экспрессии микроРНК генами-мишенями по принципу обратной связи. По результатам MTT-теста и флуоресцентной микроскопии, уровень пролиферации клеток меланомы под действием siРНК к <i>FOXC1</i> снижался через 72 ч после трансфекции<i>.</i> Методом проточной цитометрии проанализированы изменения в соотношении клеток по фазам клеточного цикла. Выявлены регуляторные взаимосвязи между <i>FOXC1</i> и miR-204-5p, а также ингибирующий эффект нокдауна <i>FOXC1</i> на пролиферацию клеток меланомы. На основании полученных результатов можно предположить, что miR-204-5p регулирует пролиферацию клеток меланомы через воздействие на экспрессию <i>FOXC1</i>. MicroRNAs epigenetically regulate gene expression and, therefore, are participating in various physiological and pathological processes. In melanoma cells, miR-204-5p is expressed at very low levels. Previously we showed that the restoration of miR-204-5p expression results in changes in melanoma cells proliferation, migration, and invasion. By bioinformatics analysis, we revealed that miR-204-5p targets mRNA encoding transcriptional factor FOXC1<i>.</i> Luciferase assay showed that miR-204-5p represses <i>FOXC1</i> expression. Transfection with the siRNA to <i>FOXC1</i> leads to down-regulation of miR-204-5p, forming a negative feedback between the microRNA and its target gene. Another effect of the <i>FOXC1</i> siRNA transfection was a decrease in melanoma cell proliferation evident from the results of MTT-test and fluorescent microscopy. The increase of G₀/G₁ positive cells ratio is accomplished with regulation pattern between miR-204-5p and <i>FOXC1</i> remaining unchanged. Taken together, our findings indicate that miR-204-5p may affect melanoma cell proliferation through its effects on <i>FOXC1.</i>

Журнал: Молекулярная биология

Выпуск журнала: Т. 55, № 4

Номера страниц: 667-675

ISSN журнала: 00268984

Место издания: Москва

Издатель: Российская академия наук

• Дубовцева И. Ю. (Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого Министерства здравоохранения России)
• Аксененко М. Б. (Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого Министерства здравоохранения России)
• Николаева Е. Д. (Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого Министерства здравоохранения России)
• Аверчук А. С. (Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого Министерства здравоохранения России)
• Мошев А. В. (Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера)
• Савченко А. А. (Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера)
• Маркова С. В. (Институт биофизики Сибирского отделения Российской академии наук, обособленное подразделение Федерального исследовательского центра “Красноярский научный центр Сибирского отделения Российской академии наук”)
• Рукша Т. Г. (Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого Министерства здравоохранения России)

• Ядро РИНЦ (eLIBRARY.RU)