Перевод названия: INTERDEPENDENCE BETWEEN THE PHENOTYPE OF DENDRITIC CELLS AND AMOUNTS OF BLOOD PROINFLAMMATORY MONOCYTES IN PATIENTS WITH KIDNEY CANCER
Тип публикации: статья из журнала
Год издания: 2019
Ключевые слова: дендритные клетки, моноциты, рак почки, фенотип, костимулирующие молекулы, презентация антигена, dendritic cells, monocytes, kidney cancer, phenotype, costimulatory molecules, antigen presentation
Аннотация: Целью исследования явилось изучение зависимости фенотипа дендритных клеток (ДК), дифференцированных из моноцитов, от количества провоспалительных моноцитов в крови у больных раком почки (РП). Обследовано 28 больных РП (Т3N0М0, светлоклеточный тип) в возрасте 40-55 лет до хирургического лечения. Диагноз верифицирован гистологически.Показать полностьюВ качестве контрольной группы проведено обследование 31 практически здоровых людей аналогичного возрастного диапазона. Мононуклеарные клетки выделяли из гепаринизированной венозной крови центрифугированием в градиенте плотности Histopaque®-1077 с последующей адсорбцией на пластике в среде RPMI-1640 в присутствии 10% аутологичной сыворотки. Незрелые ДК (нДК) генерировали из моноцитов крови путем культивирования в течение 5 суток с GM-CSF и IFNα. Активацию ДК (аДК) индуцировали внесением в среду инкубации лизата опухолевых клеток и TNFa с последующей инкубацией в течение 48 часов. Для приготовления лизата аутологичных опухолевых клеток использовали фрагмент опухоли. Фенотипирование моноцитов крови и ДК различной степени зрелости проводили методом проточной цитометрии. У больных РП в периферической крови снижается количество CD14+CD16+-моноцитов (до 42% от уровня общих моноцитов) относительно контрольного диапазона. В связи с этим, анализ зависимости фенотипа ДК, дифференцированных из моноцитов, от количества провоспалительных моноцитов в крови был проведен путем сравнения показателей с высоким содержанием провоспалительных моноцитов в крови у больных РП (>42%, приближается к уровню контрольного диапазона) и низким (<42%). Установлено, что у больных РП с низким количеством в крови провоспалительных моноцитов (<42%) повышается содержание толерогенных нДК в клеточной культуре. Особенностью фенотипа нДК у пациентов с высоким содержанием провоспалительных моноцитов в крови (>42%) является относительное увеличение экспрессии молекул, осуществляющих антигенпрезентацию и костимуляцию. При созревании/активации фенотип дендритных клеток у больных РП с различным содержанием провоспалительных моноцитов различается сильнее. У больных с низким уровнем провоспалительных моноцитов в крови в клеточной культуре формируется пул зрелых ДК с низким уровнем экспрессии CD86- и HLA-DR-рецепторов, что, соответственно характеризует слабую костимулирующую и антигенпрезентирующую активность. У больных с высоким уровнем провоспалительных моноцитов в клеточной культуре формируется пул активированных ДК с высоким уровнем функциональной активности. Выявленные различия фенотипа ДК от субпопуляционного состава моноцитов крови у больных РП характеризуют механизмы программирования клеточной дифференцировки в зависимости от микроокружения, в том числе и патогенного характера (на фоне опухолевого роста). The aim of the study was to investigate an interdependence between the phenotype of dendritic cells (DC) differentiated from monocytes and the number of pro-inflammatory monocytes in peripheral blood of patients with kidney cancer (KC). The study involved 28 patients at the age of 40-55 years suffering with KC (Т3N0М0, clear cell type) before surgical treatment. The diagnosis was verified histologically. 31 healthy agematched persons were examined as a control group. Mononuclear cells were isolated from heparinized venous blood by centrifugation in a Histopaque®-1077 density gradient followed by plastic adsorption in RPMI 1640 medium supplied with 10% autologous serum. Immature DCs (iDCs) were generated from blood monocytes by culturing for 5 days with GM-CSF and IFNα. Activation of DCs (mDCs) was induced by incubation with the tumor cell lysate and TNFα, followed by incubation for 48 hours. A tumor fragment was used to prepare the lysate of autologous tumor cells. Phenotyping of blood monocytes and DC at various maturation stages was performed by flow cytometry. The numbers of CD14+CD16+ monocytes in peripheral blood of KC patients were decreased (up to 42% of the total monocyte level) against the control ranges. In this regard, the analysis of the dependence between the phenotype of DCs differentiated from monocytes and the number of pro-inflammatory blood monocytes was carried out by comparing the groups with a high content of pro-inflammatory monocytes in the blood in KC patients (> 42%, near-control range) and low content (resp., < 42%). We have found that the contents of tolerogenic iDC in cell culture are increased in KC patients with low amounts of pro-inflammatory monocytes in blood (< 42%). A relatively increased expression of antigen-presenting and co-stimulatory molecules proved to be the specific feature of iDC phenotype in patients with high contents (> 42%) of proinflammatory monocytes in blood. The phenotype of dendritic cells in KC patients with different content of proinflammatory monocytes during maturation/activation showed more differences. In the patients with low levels of pro-inflammatory monocytes, the cell pool of in vitro maturing DCs was characterized by low level of CD86 and HLA-DR receptor expression, thus reflecting a weak co-stimulating and antigen-presenting activity. In the patients with high levels of pro-inflammatory monocytes in blood, the in vitro activated DCs showed higher level of functional activity using the above markers. The revealed differences in the DC phenotype and interrelations with amounts of blood monocyte subpopulations in KC patients may presume the programmed cell differentiation mechanisms depending on the microenvironment, under pathogenic conditions (i.e., in presence of malignant tumor growth).
Журнал: Медицинская иммунология
Выпуск журнала: Т. 21, № 4
Номера страниц: 689-702
ISSN журнала: 15630625
Место издания: Санкт-Петербург
Издатель: Санкт-Петербургское региональное отделение Российской ассоциации аллергологов и клинических иммунологов