Тип публикации: патент
Год издания: 2021
Аннотация: Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу активации пролиферативного ответа фибробластоподобных клеток стромально-васкулярной фракции (СВФ) жировой ткани. Способ включает забор жировой ткани, выделение СВФ-клеток и подсчет выделенных клеток. Затем биолюминесцентным методом определяют активность ферментов глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г6ФДГ), лактатдегидрогеназы (ЛДГ) и малатдегидрогеназы (МДГ). Если в фибробластоподобных клетках СВФ снижена активность одного, двух или трех ферментов, то для повышения эффективности пролиферативного ответа в культуру фибробластоподобных клеток СВФ добавляют необходимое количество соответствующих субстратов для тех ферментов, активности которых снижены: глюкозо-6-фосфата в количестве 2,12 мг/мл при активности Г6ФДГ ниже 84,3 мкЕ/104, глицеральдегид-3-фосфата в количестве 0,45 мг/мл при активности ЛДГ ниже 250,42 мкЕ/104, глутаминовой кислоты в количестве 1,6 мг/мл при активности МДГ ниже 212,34 мкЕ/104. Изобретение позволяет за 30-40 минут с момента забора биологического материала оценить состояние метаболизма фибробластоподобных клеток, ускорить деление и дифференцировку фибробластопобных клеток СВФ на 35% и более, а также длительно поддерживать пролиферативный ответ. 3 пр., 2 табл.<br> FIELD: biotechnology.<br> SUBSTANCE: invention relates to a method for activation of a proliferative response of fibroblast-like cells of stromal-vascular fraction (SVF) of adipose tissue. Method involves adipose tissue sampling, separation of SVF-cells and counting of recovered cells. Activity of glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PDH) enzymes, lactate dehydrogenase (LDH) and malate dehydrogenase (MDH) are then determined using a bioluminescent method. If fibroblast-like SVF cells reduce activity of one, two or three enzymes, then to increase efficiency of proliferative response in culture fibroblast-like cells of SVF added required amount of corresponding substrates for those enzymes, which activity is reduced: glucose-6-phosphate in amount of 2.12 mg/ml with G6PDH activity below 84.3 mcU/104, glyceraldehyde-3-phosphate in amount of 0.45 mg/ml with LDH activity below 250.42 mcU/104, glutamic acid in amount of 1.6 mg/ml with MDH activity below 212.34 mcU/104.<br> EFFECT: invention allows for 30–40 minutes from the moment of biological material sampling to assess the fibroblast-like cell metabolism state, accelerate division and differentiation of fibroblast-like SVF cells by 35 % and more, as well as prolonged proliferative response.<br> 1 cl, 3 ex, 2 tbl<br>